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ELISA实验中酶标板可靠性的验证原理

点击次数:753 发布时间:2017-02-13e}

虽说ELISA实验的原理及操作简单,ELISA试剂盒但是由于实验的特殊性,各个方法也都是影响到实验结果的因素之一。有操作员反应:做了很多次ELISA实验,每次都能够得到线性比较好的标准曲线,但是同样浓度的标准品每次的OD值都不一致,猜可能是酶标板的问题,有什么方法可以快速验证酶标板的可靠性吗?
我司和大家聊一聊ELISA酶标板可靠性的验证原理:
ELISA本身灵敏性很高,每次做出来的值不一样很正常,特别是od值比较大的时候更是差别很大,但是只要不要偏差太大就好,一般偏差要求10%内吧,好的数据是3%内。
首先要ELISA试剂盒稳定所有的条件,不同的条件下做的板子读值不一样很正常。在同样条件下同批次的板子,如果测定不一样,就是包被问题或者保护剂的问题,但这两个都是各个试剂盒的机密,zui好看看文献里别人怎么做的。
其次每次实验的标曲上同一浓度样品的OD值不一样是很正常的,这与抗原抗体反应体系、作用时间、显色时间等等一系列的因素有关。鉴定该ELISA体系是否可靠,zui关键的指标是加标回收率和稀释线性,如果你怀疑的话可以做一下。
一般来说,国外知名厂商的ELISA试剂盒是没有问题的。同时你还要看一下说明书中ELISA试剂盒的灵敏度,如果样品浓度低于该检测下限,则无法检测到,这是很正常的现象,并不是非要每个样品都要测出值才可以。

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