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ELISA试剂盒标本及采集、贮运因素

点击次数:595 发布时间:2017-07-24

ELISA试剂盒进口大鼠标本及采集、贮运因素:
(1)ELISA试剂盒进口大鼠严重溶血,以HRP 为标记的ELISA 测定中,残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性,催化底物显色造成假阳性; 
(2)混有红细胞的血清 易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净;
(3)如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应; 
(4)标本凝固不全,有时为了争取时间快速检测,常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清,使血清中仍残留部分纤维蛋白原,在ELISA 测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块,易造成假阳性结果; 
(5)采血试管洗涤不彻底、ELISA试剂盒进口大鼠反复使用易交叉污染; 
(6)塑料试管能吸附抗原物质 ,样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性。 
ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)ELISA试剂盒进口大鼠定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

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